纤维素酶菌种选育及发酵工艺

 

平时我们听得比较多的应当i啊是甲基纤维素,坚信大伙儿对甲基纤维素这个词也并不生疏。但提到甲基纤维素霉可能有一部分阅读者并不是非常的掌握。你了解甲基纤维素霉的菌苗培育是怎样开展的吗?下边小逼就带大家一起来了解一下吧!

 

纤维素酶菌苗培育

菌苗培育是纤维素酶生产的基本性工作中,世界各国很多权威专家开展了很多科学研究,以便生产高品质的纤维素酶商品,王家林等(1996)在消化吸收世界各国工作经验的基本上,依次引入了翠绿色木霉木10、翠绿色木霉Sn-91014、康氏木霉NT-15、黑曲霉XX-15A,在这个基础上,选用了紫外光、特殊电离辐射、线形网络加速器,亚硝基胍等物理学、有机化学的化学诱变方式,得到了增产菌种NT15-H、NT15-H1、XT-15H、XT-15H1。在其中木霉NT-15H固态塑造魅力经轻工部食品质监检测机构南京南站检验说明,过滤纸魅力为3670u/g, C1-酶魅力24460u/g,Cx-酶魅力1800u/g,已做到国际性优秀水准。

 

此菌苗在规模化生产中特性平稳。张苓花等(1998)选用康氏木霉W-925,J-931,历经浓度值为2%硫酸二乙酯和紫外光(15W、30cm、2min)复合型化学诱变后,获得了产酶促反应高的Wu-932菌苗,该菌苗CMC糖化力做到2975,过滤纸糖酶促反应为531,比考虑菌W-925各自提升了100%和81%。化工部饲料原料技术性服务站王成册等(1997)选用该管理中心的里氏木霉A3先开展紫外光和亚硝基胍复合型化学诱变后,将解决过的胞子打疫苗于化学纤维两层平板电脑上,30℃塑造5-8天,15℃置放7-10天,选择全透明圈直徑和菌体直徑较为大的单菌体开展三角瓶固态发酵再挑选,获得了产纤维素酶魅力很高的里氏木霉91-3菌种。

 

纤维素酶菌苗易衰退,衰退后其产酶力显著降低,其原因可能有三个层面:血压经化学诱变挑选的菌苗产生回复突变。

 

血液当然负突然变化。

补充菌苗长期超低温斜坡储藏,会在分生孢子上面长出次生真菌,而次生真菌所产生的分生孢子活力弱,这可能是菌苗衰退的关键原因。以便防止纤维素酶菌苗衰退,张苓花等(1998)报导,选用碎石土管储藏菌苗。将要筛粉清洗的沙子与土以3:2占比混和散装在试管婴儿内,用1kg/cm2工作压力杀菌30分钟共三次,将欲储存的斜坡菌苗制取成1000Ml胞子混液,每一个碎石土管引入0.5ml,摇匀,放进盛满没有水CaCl2真空干燥器内储存。经测量,在测定的121天内,酶的活性基本不会改变;酶促反应降低50%的時间,由基本方式的60天增加至160天,显著地缓解了菌苗衰退速率。

 

三、发醇加工工艺

纤维素酶的生产加工工艺关键有二种,即固态发醇和液體发醇,其加工工艺以下:

1、影响产酶量和魅力的要素:

影响纤维素酶生产量和魅力的要素许多 ,除菌苗外,也有塑造溫度、pH、水份、栽培基质、塑造時间等。这种要素并不是独立的,只是互相联络的。张中良等(1997)选用匀称设计方案Cl12(1210),以翠绿色木霉(T.ViriclePers.expr)为菌苗,科学研究了影响产纤维素酶的五大要素对产酶量和魅力的功效,觉得栽培基质膳食纤维成分为40%、原始pH7.5、放水4倍、在26-31℃标准下塑造45h可得到较大产酶量26mg/g和CMC酶魅力20Mg/g·h。王成华等(1997)也科学研究了其化学诱变挑选的里氏木霉91-3的产酶标准,结果显示该菌苗以7:3的秸杆粉和麸皮,另加上4%硫酸铵、0.4%磷酸二氢钾、0.1%硫酸镁为最好培养液,28-32℃为适合塑造溫度,30℃为最好溫度,4%为最好接种量,96h抵达发醇高峰期。张苓花等(1998)科学研究了以康氏木霉W-925为考虑菌,经化学诱变后获得的Wu-932纤维素酶增产菌的最好发醇标准。

 

结果显示,以1:2的麸皮和麦草粉为培养液,5%的接种量,麦草破碎平均长度3-5mm,原始pH4-5,溫度在28-35℃,发酵时间72h为最好发醇标准。

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