心脏房室结位于右心房的下部，靠近房间隔与室间隔交界处的区域。具体来说，它处于房间隔的右心房侧，冠状静脉窦开口的前上方，三尖瓣隔瓣附着缘的稍后方，属于心脏传导系统的重要组成部分。
房室结的位置与心脏其他结构密切相关。其上方与房间隔下部的结间束相连，下方延伸为希氏束。这一区域在解剖学上被称为Koch三角，由冠状静脉窦口、Todaro腱和三尖瓣隔瓣的附着缘围成，房室结恰好位于此三角的顶端附近。
房室结在心脏电生理活动中具有关键作用。作为心房和心室之间唯一的正常电传导通路，它能将来自窦房结的电冲动延迟0.1秒左右传导至心室，确保心房收缩早于心室收缩。这种延搁作用对于维持心脏有效的泵血功能至关重要。当出现房室传导阻滞等异常时，可能需要进行心电图或心脏电生理评估，以明确传导障碍的具体部位和程度。