青霉素作为β-内酰胺类抗生素，主要用于治疗敏感菌引起的感染性疾病，如链球菌感染、梅毒、淋病、肺炎球菌感染及脑膜炎等。其通过抑制细菌细胞壁合成发挥杀菌作用，但需在医生指导下使用。
1、链球菌感染
青霉素对A组β-溶血性链球菌引起的咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染具有显著疗效，也可用于治疗猩红热和链球菌导致的皮肤软组织感染。对于风湿热患者，青霉素可有效清除链球菌预防复发。
2、梅毒
作为各期梅毒的首选治疗药物，青霉素能穿透血脑屏障杀灭梅毒螺旋体。早期梅毒通过肌注苄星青霉素可获得良好疗效，神经梅毒则需静脉给予大剂量青霉素治疗。
3、淋病
针对淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖系统感染，青霉素曾是主要治疗药物。但随着耐药菌株增加，现需根据药敏结果选择用药，仅在敏感菌株感染时使用。
4、肺炎球菌感染
青霉素对青霉素敏感的肺炎链球菌所致的社区获得性肺炎、中耳炎等疾病有效。对于青霉素中介或耐药菌株，需调整剂量或更换抗生素。
5、脑膜炎
青霉素可透过发炎的脑膜治疗敏感菌引起的化脓性脑膜炎，如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等病原体感染。治疗时需联合其他抗生素并监测脑脊液指标。
青霉素使用前必须进行皮试，过敏者禁用。疗程需足量足时，避免自行停药导致治疗失败或耐药性产生。出现皮疹、呼吸困难等过敏反应需立即停药并就医。长期使用可能引起二重感染，需定期监测肝肾功能。