合谷穴位于手背第一、二掌骨之间，靠近第二掌骨桡侧的中点处。具体定位时可先将拇指和食指并拢，肌肉隆起最高点即为穴位所在，或拇指、食指张开，以另一手拇指指关节横纹放在虎口边缘，拇指尖到达之处即是该穴。
1、骨性标志定位法
合谷穴在第一掌骨与第二掌骨交汇的凹陷处。寻找时可沿食指近端掌骨向手腕方向触摸，在第一掌骨基底与第二掌骨头之间的凹陷处按压，有明显酸胀感的位置即为穴位。
2、体表投影法
将拇指和食指自然张开呈“V”字形，虎口处形成的三角形区域顶点即为合谷穴。此处皮肤较薄，皮下组织较少，按压时可触及骨缝间隙，是临床常用的简便取穴方法。
3、功能反应点验证
按压该区域时若出现向食指或前臂放射的酸麻感，或对头痛、牙痛等症状有缓解作用，可确认穴位定位准确。部分人群因个体差异可能出现位置偏移，可在骨性标志周围1厘米范围内探查敏感点。
日常按压合谷穴时建议用拇指指腹以画圈方式揉按3-5分钟，力度以产生可耐受的酸胀感为宜。注意孕妇禁用该穴位刺激，有严重手部外伤或皮肤破损者需避免直接按压。若用于疾病治疗，建议在专业医师指导下进行针灸或艾灸操作。