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核酸检测有哪些方法

徐信群 普内科 主任医师

南昌大学第一附属医院 三甲

核酸检测的方法主要有实时荧光RT-PCR法、等温扩增技术以及基因测序法等,需根据检测目的选择合适方式。

1、实时荧光RT-PCR法

该方法通过逆转录酶将病毒RNA转化为DNA,再利用荧光探针标记的PCR技术进行扩增检测。其灵敏度可达95%以上,能精准识别新冠病毒、流感病毒等病原体的特异性基因片段,是目前诊断感染性疾病的金标准。此方法需在PCR实验室完成,检测时间通常为2-4小时,广泛用于医院和疾控中心的临床诊断。

2、等温扩增技术

包括环介导等温扩增技术(LAMP),可在60-65℃恒温条件下快速扩增核酸,无需复杂的热循环仪器。与RT-PCR相比,其操作更简便,30-60分钟即可出结果,适用于口岸检疫、基层医疗机构等现场快速筛查。但该方法对引物设计要求较高,可能出现非特异性扩增,需配合比色法或浊度法判读结果。

3、基因测序法

采用高通量测序技术对病毒全基因组进行分析,主要用于变异毒株监测和溯源研究。二代测序可同时检测数百万条DNA片段,准确识别奥密克戎等变异株的特异性突变位点。全基因组测序需3-5天完成,成本较高,通常用于科研机构或公共卫生部门的流行病学调查,普通临床检测较少使用。

进行核酸检测时需前往具备资质的医疗机构,采样后避免立即进食饮水。检测前30分钟勿吸烟或嚼口香糖,采样过程中应规范佩戴口罩,与前后人员保持1米以上距离。若出现检测结果异常,应及时联系疾控部门进行复核检测。

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