MTT检测是一种常用于测定细胞增殖和活性的实验方法,在生物医学研究中应用广泛。该方法通过检测细胞代谢活性来间接反映细胞的存活和增殖情况,具有操作简便、灵敏度高等特点。
MTT检测的基本原理是利用活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶将黄色的MTT试剂还原为蓝紫色的甲瓒结晶。甲瓒结晶可被二甲基亚砜溶解后,通过酶标仪测定特定波长下的吸光度值,吸光度与活细胞数量呈正相关。该技术广泛应用于药物筛选、细胞毒性测试、肿瘤敏感性检测等领域,尤其在抗癌药物研发中具有重要价值。实验流程主要包括细胞接种、药物处理、MTT孵育、结晶溶解和吸光度测定五个步骤。
进行MTT检测时需注意细胞接种密度的优化,避免过度增殖或密度不足影响结果准确性。建议在专业人员的指导下完成实验设计,严格按照标准操作流程执行,同时设置空白对照和阳性对照组。对于关键性研究数据,建议采用CCK-8法等更灵敏的检测方法进行验证,确保实验结果的可靠性。