褪黑素治疗失眠的见效时间因人而异，通常服用后30分钟至2小时可能逐渐产生效果，但具体见效时间受多种因素影响。短期使用对调节睡眠节律有一定帮助，但长期效果存在个体差异。
褪黑素的作用机制主要通过模拟体内天然褪黑激素，向大脑传递睡眠信号。对于昼夜节律紊乱引起的失眠，如跨时区旅行导致的时差反应，规律服用3-5天可能观察到睡眠改善。慢性失眠患者可能需要更长时间调整，但连续使用不建议超过13周。不同剂型见效速度存在差异，舌下含服剂型吸收较快，普通片剂起效相对较慢。
建议每日固定时间服用，睡前30-60分钟服用效果较佳。若持续失眠超过两周或伴随日间功能损害，应及时到睡眠医学科就诊。长期失眠患者需排查焦虑抑郁、睡眠呼吸暂停等潜在病因，避免单纯依赖褪黑素。用药期间需观察是否出现日间困倦、头痛等不良反应，孕妇及自身免疫性疾病患者慎用。