合谷穴位于手背第一、二掌骨之间，靠近第二掌骨桡侧的中点处。取穴时可将拇指和食指并拢，肌肉隆起最高点即为该穴；或张开虎口，另一手拇指横纹对准虎口边缘，拇指尖自然落下处即为合谷穴。
具体取穴方法如下：1、拇指食指并拢法：将拇指和食指的指腹紧贴，手背处会形成一个明显的肌肉隆起，隆起的最高点即为合谷穴所在位置，按压时会有酸胀感。2、虎口定位法：张开手掌使虎口呈90度角，将另一只手的拇指横纹对准虎口边缘，此时拇指指尖自然弯曲接触到的凹陷处即为该穴位。
该穴位左右手各有一个，位置对称。因个体手部骨骼结构存在差异，实际定位可能略有不同，建议通过触摸寻找明显压痛点。需要注意的是，孕妇不宜频繁刺激此穴位，有特殊健康需求者应在专业医师指导下进行穴位按压或针灸治疗。