细菌内毒素的检查方法主要包括凝胶法和光度测定法,其中光度测定法又分为动态浊度法和显色基质法。这些方法用于检测药品、医疗器械等样品中的内毒素含量,确保其符合安全标准。
1、凝胶法
通过鲎试剂与内毒素发生凝集反应的原理进行检测。将样品与鲎试剂混合后,在37℃恒温条件下孵育,若形成凝胶则判定为阳性。此方法操作简便、成本较低,常用于常规筛查或半定量分析,但灵敏度受环境因素影响较大。
2、动态浊度法
基于内毒素浓度与反应液浊度变化速率的关系进行定量检测。通过仪器实时监测反应过程中浊度的变化,绘制标准曲线后计算样品中的内毒素含量。该方法灵敏度高、重复性好,适用于精确测定生物制品或高纯度药品的内毒素水平。
3、显色基质法
利用鲎试剂中的酶促反应产生显色物质,通过吸光度变化定量内毒素。样品中的内毒素激活鲎试剂中的酶系统,裂解显色底物后释放黄色产物,在405nm波长处测定吸光度值。这种方法特异性强、抗干扰能力较好,尤其适合复杂基质样品的检测。
上述检测需在严格控制的实验环境下进行,操作人员应具备专业资质。检测过程中需使用标准内毒素进行对照实验,并遵循《中国药典》或国际相关规范。若样品检测结果超出限值,需重新取样复测或结合其他方法验证,以确保结果的准确性和可靠性。