血细胞计数板是实验室中用于计数血液或其他液体中细胞数量的常用工具,其使用过程需要规范操作以保证结果准确。使用时需注意清洁、样本处理、计数方法等关键步骤,避免操作不当影响检测结果。
使用血细胞计数板前需用酒精棉清洁计数板和盖玻片,确保表面无灰尘或残留物。将盖玻片覆盖在计数板两侧凸起的支撑柱上,形成均匀的计数室。样本需根据细胞浓度进行适当稀释,例如红细胞常用生理盐水稀释200倍,白细胞用稀醋酸溶液稀释20倍。用微量移液器吸取约10μL稀释后的样本,沿盖玻片边缘缓慢注入,依靠毛细作用使液体充满计数室,避免产生气泡或溢出。
计数时需在显微镜低倍镜下观察,红细胞通常计数四角四个大方格内的细胞总数,白细胞则计数四角及中央共五个大方格内的细胞数。计算时需结合稀释倍数及计数区域体积进行换算,例如红细胞浓度公式为:四角大方格总细胞数/4×10^4×稀释倍数。操作过程中需避免剧烈晃动样本导致细胞分布不均,计数板使用后应立即用蒸馏水冲洗并晾干,不可用硬物擦拭以免划伤刻度。
完成计数后需重复检测2-3次取平均值以提高准确性。若细胞密度过高出现重叠现象,应重新稀释样本。使用过程中应佩戴手套,避免直接接触生物样本,所有操作需在生物安全柜内进行。不同型号计数板的网格设计可能有所差异,使用前应仔细阅读说明书确认具体规格参数。