自行车骑行是否损伤膝盖通常与骑行姿势、强度以及个体情况有关，正确骑行一般不会损伤膝盖，但不恰当的骑行方式可能增加膝盖负担。若存在膝盖疾病或运动过量，也可能引发不适。
骑行时膝盖损伤常见于姿势不正确的情况，如座椅过低会导致膝盖弯曲角度过大，增加关节压力。长期如此可能引起软骨磨损或肌腱炎。此外，突然增加骑行距离或频率会使膝关节周围肌肉疲劳，降低对关节的保护作用。每日骑行超过2小时且缺乏休息的人群更易出现此类问题。
合理骑行反而能增强膝关节稳定性。将座椅调至合适高度（脚踏至最低点时膝盖微屈）、匀速踩踏、佩戴护膝等措施可有效分散压力。每周3-4次、每次40-60分钟的中等强度骑行，配合股四头肌强化训练，有助于提升膝关节耐受力。已有半月板损伤或关节炎患者，建议咨询医生后制定骑行方案。
出现骑行后膝盖持续疼痛、肿胀或活动受限，应及时暂停运动并就医检查。日常骑行建议佩戴运动护具，运动前后做好拉伸，避免在陡坡路段采用大齿比骑行。体重基数较大者可将骑行与游泳等低冲击运动交替进行，减少关节负荷。