肥厚性心肌病的诊断需结合临床表现、影像学检查及遗传学评估等多方面信息。通常需通过超声心动图、心脏磁共振、心电图等检查综合分析，同时排除其他原因引起的心肌肥厚。
超声心动图是诊断肥厚性心肌病的首选方法，可显示左心室壁厚度≥15毫米且无其他导致心肌肥厚的病因。非对称性室间隔肥厚是典型表现，部分患者可能伴有左心室流出道梗阻。心脏磁共振能更清晰地显示心肌纤维化或局部肥厚区域，尤其适用于超声结果不明确的情况。
心电图检查常发现左心室高电压、ST-T改变、异常Q波等表现，但缺乏特异性。动态心电图有助于评估心律失常风险。对于有家族史或疑似遗传性病例，基因检测可发现肌节蛋白相关基因突变，但阴性结果不能完全排除诊断。
若存在不明原因的心肌肥厚、活动后气促、胸痛或晕厥等症状，建议尽早就诊心血管专科。诊断过程中需排除高血压、主动脉瓣狭窄等继发性心肌肥厚，并根据个体情况制定治疗方案。