血细胞计数板的计数操作通常包括样本稀释、充池、显微镜观察及计算等步骤，需严格按照规范操作以确保准确性。以下是具体的操作流程：
1、样本稀释
取适量血液样本，使用生理盐水或专用稀释液按比例稀释。例如，白细胞计数需稀释10-20倍，红细胞则需稀释200倍左右，具体比例根据检测项目调整。稀释过程需充分混匀避免细胞聚集。
2、放置盖玻片
将专用盖玻片紧密覆盖在计数板两侧的支撑平台上，利用其表面张力形成标准高度为0.1mm的计数室。操作时应避免手指触碰计数区域，防止产生气泡影响容积准确性。
3、充池操作
用微量吸管吸取稀释后的样本，从盖玻片边缘的V型槽处缓慢注入，使液体依靠毛细作用自然充满计数室。需注意液体不能溢出两侧的溢流槽，否则需重新制备样本。
4、细胞沉降
将充池完成的计数板水平静置3-5分钟，使细胞充分沉降到计数室底部。此期间需避免振动操作台，防止细胞重新悬浮影响分布均匀性。
5、显微镜计数
使用10倍物镜定位计数区域，40倍物镜进行细胞计数。红细胞计数需统计中央大方格内四角及中心的5个中方格，白细胞则需统计四角4个大方格。根据公式：细胞数/μL=计数值×稀释倍数×10⁴/计数区域面积，完成最终计算。
操作过程中需注意实验环境的清洁，计数板使用后应立即用酒精棉片擦拭，避免样本残留结晶损坏刻线。对于异常结果建议重复检测，必要时进行台盼蓝染色排除死细胞干扰。该操作需在生物安全柜中进行，严格遵循无菌操作规范。