蛋白质与双缩脲反应是一种用于检测蛋白质存在的化学显色反应，其原理基于碱性环境下铜离子与肽键的络合作用。该反应常用于生物化学实验及临床检测中，操作简便且结果直观。
1、反应原理
双缩脲试剂中的氢氧化钠提供碱性环境，硫酸铜释放的铜离子与蛋白质中的多个肽键结合。肽键中的氮原子和氧原子可与铜离子形成稳定的五元环螯合物，这种络合结构导致溶液颜色发生变化。
2、颜色变化
反应后溶液呈现紫色或紫红色，颜色深浅与蛋白质浓度呈正相关。这种显色现象是由于铜离子与至少两个相邻肽键结合后，电子跃迁吸收特定波长的可见光所致。需要注意的是，若蛋白质含量过低，可能仅出现淡蓝色或无明显变化。
3、应用场景
该反应广泛用于医学检验中血清总蛋白含量的快速筛查，以及实验室中蛋白质溶液的定性或半定量分析。其优势在于无需高温加热，且对完整蛋白质分子特异性较高，但无法区分不同种类的蛋白质。
进行该实验时需控制反应体系的酸碱度，强碱性环境是显色的必要条件。需注意高浓度铵盐、某些氨基酸（如色氨酸）或脂类物质可能干扰显色结果。临床检测时应结合其他指标综合判断，避免单一实验的局限性。