雌二醇作为雌激素类药物，通常具有促进女性第二性征发育、维持生殖系统功能、调节月经周期、预防骨质疏松以及参与代谢调节等作用。其应用需在医生指导下进行，不可自行用药。
1、促进女性第二性征发育
雌二醇可刺激乳腺导管和腺泡的发育，促使脂肪在臀部及胸部沉积，形成女性特有的体型特征。该作用主要在青春期阶段显现，对于原发性卵巢功能不全患者可辅助性征发育。
2、维持生殖系统功能
该激素能促进子宫内膜增生，增加宫颈黏液分泌量并改变其理化性质，为受精卵着床创造适宜环境。同时可维持阴道黏膜的厚度和弹性，防止上皮萎缩。
3、调节月经周期
通过负反馈机制作用于下丘脑-垂体-卵巢轴，调节促性腺激素释放激素的分泌。在人工周期疗法中，雌二醇与孕激素序贯使用可模拟正常月经周期，改善闭经或月经紊乱。
4、预防骨质疏松
雌激素可抑制破骨细胞活性，减少骨吸收过程。临床研究表明，绝经后女性补充雌二醇能使骨密度下降速率降低50%-70%，有效预防骨质疏松性骨折。
5、参与代谢调节
该激素可促进肝脏合成多种结合蛋白，调节脂蛋白代谢。研究显示其能升高高密度脂蛋白胆固醇水平，降低低密度脂蛋白胆固醇浓度，对心血管系统具有保护作用。
使用雌二醇制剂期间需定期监测子宫内膜厚度、乳腺情况及凝血功能。存在乳腺癌、血栓病史或肝功能异常者禁用，用药过程中如出现异常阴道出血、乳房肿块等情况应立即停药就诊。长期使用需每年评估治疗风险和获益比。