β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶
简介:β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷,也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷。该酶广泛存在于各种组织器官、体液、血细胞中,是溶酶体中的一种酸性水解酶。其测定方法有比色法和荧光光度法。
简介:β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷,也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷。该酶广泛存在于各种组织器官、体液、血细胞中,是溶酶体中的一种酸性水解酶。其测定方法有比色法和荧光光度法。
(1)对硝基酚比色法:
①基质对硝基酚应纯化,配制前置50℃烘24h。用10mmol/LNaOH配成0.04mmol/L浓度,用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线,λmax=401nm,根据IFCC标准,Aλmax=0.7316~0.7388,Eλmax=18380±90(25℃)。根据对硝基酚的摩尔吸光系数,计算NAG活性单位的公式为:
以上公式是根据IFCC的标准E值计算的,各实验室应根据具体仪器条件测定E值,建立计算式。
②底物溶解度小,配制时应先用适量pH4.6缓冲液调成糊状,再逐渐加缓冲液至所需量。
③测定结果超线性范围时,应将标本用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
④尿酶浓度受尿量影响较大,应留取24h尿量。若以NAG/g肌酐比值计算酶排出率,即不受尿浓缩或稀释的影响,又不需留24h尿。
(2)荧光光度法:
①荧光法测NAG已有国产试剂盒,其敏感度高,不受尿色干扰。
②也可用上海第三分析仪器厂产930荧光光度计,激发滤光片360,发射滤光片用(400+450)复合,效果满意。
③本法酶反应液中各成分浓度为:底物1.33mmol/L,枸橼酸20mmol/L,Na2HPO432mmol/L。
④配试剂所用溶剂应用重蒸馏水,底物应无游离4-MU,BSA中应无该酶或用50℃加热2h灭活。
⑤血清中NAG于4℃稳定数小时至数天,-20℃可稳定数月。尿标本4℃稳定1周,也可用枸橼酸盐抗凝血浆。
⑥β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解,一种是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.30),另一种是β-N-乙酰已糖苷酶(EC3.2.1.52),只有对提纯的酶才能限定EC3.2.1.30或EC3.2.1.52。目前国内文献中常称的NAG,严格地说是按所用底物命名的,而不是指酶对底物的特异性。所以目前国外文献常泛称β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
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头晕是一种常见的临床症状,可能由多种原因引起。首先,神经系统疾病如脑血管疾病、脑肿瘤、癫痫等可能导致头晕。其次,心血管疾病如心律失常、心力衰竭、低血压等也可能引起头晕。此外,内耳疾病如美尼尔病、前庭神经炎等也可能导致头晕。内分泌代谢疾病如低血糖、甲状腺功能异常等也可能引起头晕。最后,精神心理因素如焦虑、抑郁等也可能导致头晕。因此,头晕的诊断需要综合考虑患者的临床表现、病史和相关检查结果。
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肩膀疼痛可能由多种原因引起,包括肌肉劳损、肩周炎、肩袖损伤、关节炎、颈椎病变等。肌肉劳损通常是由于过度使用或不正确的运动方式导致。肩周炎是一种自限性疾病,表现为肩关节活动受限和疼痛。肩袖损伤则可能由于肩关节的肌腱或韧带损伤。关节炎可能由感染、退行性变化或其他炎症性疾病引起。颈椎病变可能导致神经根受压,引起肩部疼痛。针对不同原因,治疗方法也有所不同,可能包括物理治疗、冷热敷、关节活动练习、改善姿势等非药物治疗手段。
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