验孕棒一般在月经推迟7天左右或同房后14天左右检测较为准确。此时尿液中的人绒毛膜促性腺激素水平较高，检测结果相对可靠。过早使用可能因激素水平不足而出现假阴性。
检测时间的选择与体内激素水平密切相关。怀孕后胎盘会分泌人绒毛膜促性腺激素，但需要一定时间才能在尿液中达到可检测浓度。受精卵着床大约需要6-8天，之后激素水平开始上升。若月经周期规律，通常在停经35天时激素浓度可达25mIU/ml以上，符合多数验孕棒检测阈值。
晨尿检测准确性更高。经过夜间代谢蓄积，晨尿浓缩度较高，激素浓度更易被检出。若已出现明显妊娠反应如乳房胀痛、恶心等，即使未到最佳检测时间也可尝试检测。检测时需注意将试纸完全浸入尿液中，但不可超过标记线，读取结果需在5分钟内完成。
若检测结果为阴性但月经仍未至，建议间隔3-5天复测。不同品牌验孕棒灵敏度存在差异，部分产品需激素浓度达50mIU/ml才能显示阳性。血液HCG检测能更早发现妊娠，同房后10天即可通过静脉采血获得准确结果。检测时应仔细阅读说明书，避免因操作不当影响结果判断。