木耳泡发一夜后是否可以食用需视具体情况而定。若泡发环境温度较高或木耳已出现变质，则不建议食用；若在低温环境下保存且未变质，通常可以食用，但仍需谨慎。
高温环境下长时间泡发的木耳容易滋生细菌，尤其是椰毒假单胞菌，其代谢产生的米酵菌酸毒素耐高温且毒性强，误食可能引发恶心、呕吐甚至器官衰竭。若木耳表面出现黏稠感或异味，则表明已变质，必须丢弃。低温环境如冰箱冷藏可延缓细菌繁殖，但泡发时间超过24小时仍可能滋生微生物，建议先观察外观和气味。
日常泡发木耳时建议用冷水浸泡2-4小时，避免隔夜泡发。若发现泡发木耳有异常情况，应立即停止食用。如食用后出现腹痛、腹泻等不适症状，需及时就医进行对症处理。