内酰胺类抗生素通常通过干扰细菌细胞壁的合成来发挥作用。它们主要针对细菌的青霉素结合蛋白（PBPs），这些蛋白参与细胞壁肽聚糖的交联过程。当内酰胺类抗生素与PBPs结合后，会阻止肽聚糖链的交联，导致细胞壁合成受阻，最终使细菌细胞壁变得脆弱，无法维持正常的形态和功能，从而导致细菌死亡。
内酰胺类抗生素的作用机制具有高度选择性，主要针对细菌细胞壁的合成过程，而人体细胞没有类似的细胞壁结构，因此对人体细胞的毒性相对较低。此外，内酰胺类抗生素对革兰阳性菌和某些革兰阴性菌具有较好的抗菌活性，但对一些具有特殊细胞壁结构的细菌，如绿脓杆菌等，其抗菌效果可能较差。
在使用内酰胺类抗生素时，应严格遵医嘱，按照医生的指导用药，不可自行盲目使用。同时，要注意观察药物的疗效和可能出现的不良反应，如出现过敏反应、肝肾功能损害等，应及时就医，调整治疗方案。